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  • 猪场免疫了圆环苗却依然不稳定?原来还有这么多细节要考虑

  • 发布日期:2019-11-05 19:12:35 信息来源:互联网
  • 非洲猪瘟对产业造成了巨大的危害,加快了生猪循环和产业整合的进程,重塑了产业格局。对养猪的人来说,这既是最坏的,也是最好的。一方面,它受到非洲猪瘟的困扰,对生物安全的要求不断提高。另一方面,猪的高价带来了前所未有的繁荣,为养猪户提供了巨大的发展机遇。

    养猪场已经接种了猪圆环病毒2型疫苗,但仍有病毒循环?大多数养猪场没有适当的免疫程序。《农业宝典》新畜牧网记者王智贤

    猪圆环病毒病是困扰养猪业的重要疾病之一,在生猪价格高企时期,对农场收入的影响更为显著。舒通(中国)于今年8月底推出灭活猪圆环病毒1-2型嵌合疫苗“瑞元安”,成为第三款正式进入中国的进口猪圆环病毒疫苗。“瑞源安”的优势和特点是什么?它将如何帮助用户拥抱高回报?

    10月11日,华南农业大学研究员、朔城猪业务部技术负责人宋昌旭博士和朔城猪业务部高级产品经理吴华参观“农才大视野”,讲解非洲猪瘟时代2型猪圆环病毒病的防控和农民免疫程序的优化。

    猪圆环病毒2型疫苗的日常免疫可能不能完全理解猪圆环病毒病。

    华南农业大学研究员宋长旭

    研究员宋长旭将首先给你一份关于猪圆环病毒病流行和免疫控制的专题报告。猪圆环病毒2型在动物界非常普遍。它是一种单负链dna病毒,没有包膜,直径只有17到20纳米。它是已知最小的脊椎动物病毒。这种病毒由简单的环状dna加上衣壳蛋白组成,只有两种主要蛋白——cap蛋白(用于制造疫苗和监测抗体的靶蛋白)和rep蛋白(驱动复制的复制酶)。圆环病毒对外部环境有很强的抵抗力。

    Pcv1于1974年首次作为pk-15细胞中的常见污染物被发现。1991年,发现pmws与pcv2相关,猪圆环病毒的重要性被重新认识。pcv1和pcv2都主要包含orf1和orf2读取帧。Orf1编码与病毒复制相关的rep蛋白,orf2编码病毒衣壳蛋白(具有良好的免疫原性)。2017年,pcv3首次在美国被发现。猪圆环病毒的三种类型差异很大,其中pcv2和pcv3与猪的疾病关系更密切,但对pvc3的研究还不够清楚。猪圆环病毒具有很大的多样性。

    细分集中于2型圆环病毒,有5个亚基因型2a、2b、2c、2d和2e。目前,2a和2b亚型主要流行,最近的研究证明2d和2e亚型也逐渐增加。

    目前的研究表明,猪圆环病毒可以通过鼻、口、扁桃体、支气管、眼睛分泌物、粪便、唾液、尿液和牛奶传播,传播途径非常广泛。此外,猪圆环病毒2型可以通过猪精液和母猪胎盘传播给仔猪。然而,当感染压力相对较高而感染压力相对较低时,通过胎盘的传播通常不通过胎盘传播。

    宋长旭指出,在此次非洲猪瘟期间,人们非常关注血浆蛋白粉对非洲猪瘟的传播。事实上,已经证明血浆蛋白粉能够传播猪圆环病毒并发挥重要作用。传播途径的研究有助于猪圆环病毒病的预防和控制。

    2000年后中国猪圆环病毒的主要亚型为2b亚型,其次为2d和2e亚型。猪圆环病毒在猪群中广泛流行,我国南方猪场抗体阳性率可达100%。猪圆环病毒疫苗推广后,疾病的发生阶段将会发生一些变化。根据对11个规模化猪场猪圆环病毒1型和2型的调查,猪圆环病毒1型占4.21%,猪圆环病毒2型占30.61%。2004年和2005年,猪圆环病毒1型的阳性率约为11%-12%。可以看出,猪圆环病毒1型的感染逐年减少,其原因可能与猪圆环病毒2型疫苗的使用有关。因为猪圆环病毒1型和猪圆环病毒2型之间存在一定的交叉保护,所以使用猪圆环病毒2型疫苗对猪圆环病毒1型的清除有影响。

    由于疫苗的广泛使用,目前后备母猪和母猪的中毒病例似乎会减少,但产房里的小猪会更多,猪又的生长和育肥也会更多,这表明免疫策略和程序需要改进。

    就病毒的临床表现和解剖特征而言,最令人关注的问题是仔猪断奶后多系统衰竭综合征,而宋长旭也指出了更多的生殖问题,如母猪繁殖、发情异常、子宫积脓等。非常严重。通常人们没有意识到隐藏的原因是猪圆环病毒2型的感染。后来,通过用猪圆环病毒2型疫苗免疫,发现这些问题可以得到解决。同时,还观察到,在早期患有严重猪圆环病毒感染的一些养猪场,健康后代的数量仅为6或7个,免疫3个月至6个月后的后代数量可增加10个或更多。

    此外,通过免疫2型猪圆环病毒疫苗,可以明显改善哺乳猪和生长育肥猪的顽固性腹泻,以及生长育肥猪感染圆环病毒后猪群不规则、呼吸道问题和对生长速度的影响。

    在疫苗问世之前,人们对预防和控制猪圆环病毒病不知所措。现在有了疫苗,所以变得简单了。如何正确使用疫苗?宋长旭认为免疫母猪和仔猪是非常经济和必要的。如果母猪免疫良好,小猪以后可以免疫。如果母猪没有免疫,小猪越早免疫越好。此外,必须详细研究免疫计划,并考虑实验室诊断技术和生产结果的结合。

    你如何评价猪圆环病毒疫苗的效果?宋昌旭建议从以下几个方面进行评价:首先是生产性能,然后是抗体水平的均匀性,以及血液和淋巴结中病毒载量的降低。

    嵌合环疫苗“瑞元安”可预防pcv2病毒血症。

    舒通猪事业部技术总监王克文

    朔城猪科技术负责人王克文介绍了“瑞源安”的特点和猪圆环病毒疫苗的免疫策略。

    舒通的“瑞元安”,最近在中国上市,是一种嵌合疫苗。王克文介绍说,pcv1和pcv2病毒的结构非常相似,都被一层衣壳包围。环状dna主要由两个基因组成-orf1和orf2。Orf1主要表达复制相关蛋白,orf2主要表达衣壳蛋白。“瑞元安”pcv1-2嵌合体orf1来自pcv1病毒,orf2来自pcv2。所以外壳是pcv2,复制酶来自pcv1。因为它有与pcv2外观相同的完整衣壳,所以识别时免疫系统也与pcv2相同,免疫原性好。但是嵌合病毒的复制能力来自pcv1,生长和复制更加稳定。此外,嵌合病毒在猪细胞上培养,不含异源蛋白。

    “瑞元安”采用slcd sp水包油双佐剂,相互协同作用。slcd的主要功能是刺激机体尽快产生免疫反应,而sp油主要增加抗原表面积,促进抗原呈递,有利于免疫细胞的捕获、吞噬和再加工,从而延长抗原加工时间。两种佐剂的协同作用使免疫反应更快,具有更强的细胞免疫和体液免疫,保护时间更长。

    关于免疫效果,王克文分享了两项公开发表的抗病毒实验研究。第一个实验使用pcv2双阴性猪。第一组对照组、第二组和第三组用瑞元安免疫3周龄仔猪。该病毒在免疫接种后3周受到攻击,9周时被杀死。

    结果表明,免疫14天后elisa抗体变为阳性,而对照组仅在攻击后出现抗体变化,抗体值差异显著。对照组在发病后,免疫组织化学和淋巴损伤程度很高,而免疫疫苗组的损伤程度很低。从病毒血症的角度来看,对照组100%的猪在感染后10天出现病毒血症,而免疫组85-95%的猪在整个试验期间没有出现病毒血症。进一步使用荧光定量pcr来观察由病毒血症引起的猪病毒血症的程度。免疫组的病毒滴度比对照组降低1000-10000倍。美国上市的“瑞源安”圆环病毒疫苗有一个标签,表明它可以预防pcv2病毒血症的发生。

    第二项试验是瑞元安免疫后猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型的双重挑战试验。pcv2b和prrsv的剂量为3ml105tcid50/ml,研究途径为滴鼻。3周龄免疫,20周龄双重挑战,25周龄尸检。血样采集10次(6、9、12、16、20、21、22、23、24、25周),称重3、20、25周,感染后每天记录临床分数。结果表明,免疫组无临床疾病,而对照组表现为中重度疾病,双重攻击的临床表现非常明显。免疫组病毒血症明显减少,日增重也明显优于非免疫组。

    吴华,朔城猪事业部高级产品经理

    解决效果不理想,猪圆环病毒疫苗的免疫程序“分三步走”。然而,尽管进行了广泛的免疫接种,猪圆环病毒2型在该领域的流行情况仍然不容乐观。通过血清学(朔腾酶联免疫试剂盒)和qpcr调查,朔腾实验室发现大多数猪场仍存在猪圆环病毒2型的明显循环。80%在生长育肥猪阶段循环,10%在产房循环病毒。另有10%在保育猪群中流通。荧光定量pcr结果表明,部分猪场在发育期pcv2拷贝数较高。

    为什么会这样?是疫苗的质量还是免疫程序?如果这是免疫程序的问题,应该如何优化?

    王克文谈到如何解决圆环病毒疫苗临床免疫效果不理想的问题。一方面,我们应该选择质量优良的可靠疫苗;另一方面,我们应该有一个合理的免疫计划。在目前的感染情况下,如何优化pcv2的免疫程序可以简单地分为三个步骤:

    第一步是找到减少母体抗体干扰的方法。研究表明,当母体ipma抗体低于8log2时,免疫后不会被母体抗体感染,但当ipma抗体低于5.5log2时,就易受感染。

    然而,ipma抗体法在中国很少使用。根据ipma与舒通合生元试剂盒elisa抗体值的相关性研究,当elisa抗体为400-650(仅适用于于硕腾的该试剂盒)时,可接种疫苗。

    在中国,根据对不同免疫状态母猪生产的21日龄仔猪母源抗体水平的调查,如果只考虑降低母猪母源抗体的干扰,生长猪的接种时间可以大致推荐为:

    如果条件允许,试剂盒可用于评估目标时间点的母体抗体值。

    第二步,评估生长猪pcv2感染的周期时间和强度,并根据免疫反应的特征在感染发生前3周完成接种。

    第三步是通过整合母体抗体的影响和pcv2的周期时间和强度来优化生长猪的免疫程序。考虑pcv2循环时间和压力,优化猪群免疫程序。后备猪在交配前接种了两次疫苗。

    互联网用户提问:

    1.请问防治猪圆环病毒在非鼠疫防治中的意义是什么?宋长旭:过去一年左右,非洲猪瘟对中国养猪业产生了巨大影响。在非洲猪瘟期间,整个行业陷入恐慌,不知所措。在这种情况下,包括圆环病毒疫苗在内的许多疫苗的免疫接种停止了。然而,在恐慌和困惑之后,我们通过提高生物安全水平逐步总结出应对措施,我们对预防和控制非洲猪瘟的信心也在逐步提高。下一步是考虑如何进行有针对性的消除,以及如何在后非洲猪瘟时代恢复生产。此时,我认为预防和控制圆环病毒病的重要性将得到强调。圆环病毒病是一种免疫抑制疾病,与多种疾病相互作用。在后非洲猪瘟时代,通过圆环病毒疫苗免疫提高猪的免疫能力应该对繁殖产生积极影响。

    2.猪场的仔猪已经接种了循环疫苗,但抗体水平不高。原因是什么,如何解决?王克文:首先,我们需要知道我们使用的是什么样的工具包。我们现在似乎使用普通试剂盒和廉价疫苗来基本上提高抗体。然而,如果抗体不起作用,我认为可能需要更多考虑几个因素:第一,疫苗的质量;第二是免疫程序。三是疫苗保存问题,或疫苗接种技术等。事实上,养猪场的免疫效果不理想是很常见的。

    3.圆环病毒的现场防控非常复杂,因为现场不仅有圆环病毒,还有蓝耳病、假性躁狂症、支原体病和猪瘟。你能分享圆环病毒和其他疾病之间的相互作用和影响吗?宋长旭:很多疾病都有相互作用,但圆环病毒与其他病原体的相互作用更为突出。首先,因为它很普遍,几乎所有的猪都有。其次,它是一种免疫抑制疾病。

    圆环病毒与一些细菌性疾病,如副猪嗜血杆菌和链球菌,有很强的相互作用。在养猪场的早期,副猪嗜血杆菌、喘气病和链球菌的感染率非常高,导致药物剂量非常高。许多圆环病毒疾病自然消失,直到我们用疫苗免疫它们。圆环病毒感染也会影响其他疫苗的免疫效果,如刚才提到的对猪瘟免疫的影响。事实上,在我们的养猪场处理完蓝耳病和圆环病后,许多其他问题自然会得到解决,医疗费用也会大幅下降。当然,我们也必须密切关注非洲猪瘟的预防和控制。

    除了圆环病毒影响其他疾病外,其他疾病的混合感染也会加剧圆环病毒的感染,如prrs mh等。,这会加重圆环病毒病的症状。

    4.我们如何评价圆环病毒疫苗在现场的免疫效果?宋昌旭:很多人说圆环病毒疫苗的使用不容易评估,但我个人认为圆环病毒疫苗是最容易评估、最直观、最直接的疫苗。首先,可以从生产指标如料肉比、日增重、育种、产出率等进行评价。和病毒血症,可用于定量评价圆环病毒疫苗的免疫效果。

    王克文:对pcv2疫苗的免疫评价可以分为几个方面:第一是减少临床疾病的发生;二是提高生产绩效。三是实验室可以通过淋巴结免疫组织化学来评估抗体值。相对而言,临床上最重要的是减少临床疾病。在非洲猪瘟的影响下,许多猪场将配备荧光定量pcr,病毒血症和病毒载量的比例也可以通过特异性定量pcr进行评估。

    5.对不起,许多循环疫苗是基于五氯苯甲醚设计的,但目前流行的菌株不仅是2a,还有2B和2D。五氯苯甲醚与2B和2D有交叉保护作用吗?pcv2疫苗能保护pcv3吗?宋昌旭:自从2018年发现五氯苯酚以来,我们的实验室检测发现,目前五氯苯酚的流行率仍然很高。pcv2和pcv2之间cap蛋白和整个基因组的同源性仅为约30%。目前,pcv3的分离和鉴定仍然比较困难,因此建立发病机制模型一直是一个难题。因此,没有可靠的证据表明2型圆环病毒疫苗能够保护3型。

    然而,根据生产情况,在某些领域仍有一些与3型托洛韦病毒相关的疾病,但没有特别准确的结论。然而,与圆环病毒相关的疾病目前仍是可控的,需要进一步研究。

    圆环病毒基因亚型之间的同源性相对较高。目前,根据实验室数据,无论哪种疫苗,亚型之间的交叉保护都没有问题。临床上,2a和2b菌株基本上可以解决目前的圆环病毒问题。

    6.圆环病毒疫苗现在分为几种类型,包括灭活全病毒疫苗、亚单位疫苗和嵌合病毒全病毒疫苗。这三种类型有什么不同?宋长旭:简要介绍三种疫苗的定义。(全病毒疫苗:培养全病毒和灭活佐剂形成疫苗;亚单位疫苗:疫苗由载体表达cap蛋白佐剂形成;嵌合疫苗:病毒dna由pcv1的orf1和pcv2的orf2以与全病毒和灭活佐剂相同的培养模式构建)

    王克文:嵌合疫苗和全病毒灭活疫苗都是全病毒疫苗。疫苗外观充满病毒颗粒,具有抗原质量高、纯度高的特点。亚单位基因工程疫苗高表达cap蛋白。

    7.猪场接种圆环病毒疫苗后出现应激反应,包括拆包、发热等。原因是什么?王克文:接种疫苗后会有一些反应,但是如果反应太大,就会变成副作用。第一个原因是有许多外来蛋白质。其次,有时高病毒载量会增加血清的用量。第三种是佐剂,其中一些非常刺激。还有一些如疫苗被污染。

    宋长旭:副作用的问题非常复杂。就佐剂而言,如果想提高免疫效果,副作用可能很大。因此,疫苗企业需要在生产过程中找到平衡点。也有一些疫苗在类毒素方面可能超过标准,包括热源问题、水质问题等。此外,压力的发生不能完全用疫苗来解释,猪的状态也很有影响。

    资料来源:新田园网络

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